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前面幾期內(nèi)容給大家總結(jié)了如何判斷在培養(yǎng)過(guò)程中，細(xì)胞有沒(méi)有被支原體污染，還沒(méi)看的小伙伴點(diǎn)擊下方傳送鏈接即可到達(dá)。
DIY判斷細(xì)胞的支原體污染
支原體實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法大PK
今天就來(lái)嘮嘮，怎樣處理細(xì)胞的支原體污染。
由于每個(gè)人的實(shí)驗(yàn)以及樣品情況不一樣，所以處理方法也需要分情況討論，給大家簡(jiǎn)單列舉幾個(gè)場(chǎng)景，便于理解。
Vol.1
情景一：實(shí)驗(yàn)剛開(kāi)始且細(xì)胞不那么貴重
實(shí)驗(yàn)剛剛開(kāi)始，所用到的細(xì)胞也不貴重。培養(yǎng)了幾代發(fā)現(xiàn)細(xì)胞狀態(tài)不對(duì)勁，一檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，不幸感染了支原體。
對(duì)于這種情況，我們的建議是，直接把細(xì)胞連同用過(guò)的試劑一起丟掉，并對(duì)空間和器械進(jìn)行支原體祛除的處理（后文會(huì)將具體方法）。
畢竟細(xì)胞用的支原體祛除試劑也不便宜，而且需要的時(shí)間也不算短，搞科研是個(gè)費(fèi)錢費(fèi)時(shí)間的活，要會(huì)精打細(xì)算。
處理方法：扔掉樣本并清潔空間和器械
處理難度：
Vol.2
情景二：細(xì)胞經(jīng)過(guò)特殊處理不愿放棄
用到的細(xì)胞雖然不算特別珍貴，但實(shí)驗(yàn)已經(jīng)開(kāi)始一段時(shí)間了，傾注了時(shí)間和心血的。細(xì)胞經(jīng)歷了轉(zhuǎn)染或者體外刺激，好不容易擴(kuò)增起來(lái)，好幾盤(pán)細(xì)胞，難道要一夜回到解放前嗎？當(dāng)！然！不！可！以！
是時(shí)候展示真正的技術(shù)了！推薦大家使用MB公司的專li符合抗生素Zell Shield®
按照以下使用說(shuō)明對(duì)細(xì)胞進(jìn)行處理：
1、在每次使用Zell Shield®之前，細(xì)胞傳代時(shí)，先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法"處理好細(xì)胞，再使用加了Zell Shield®的培養(yǎng)基養(yǎng)細(xì)胞，能達(dá)到最佳的祛除支原體的效果。
2、Zell Shield®常規(guī)為-18℃保存，使用前先融化分裝，后續(xù)依舊-18℃避光保存，使用時(shí)按需融化配置。避免反復(fù)凍融。
3、Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養(yǎng)基（例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield®，50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養(yǎng)基使用）。
處理方法：Zell Shield®處理細(xì)胞
并清潔空間和器械
處理難度：
Vol.3
情景三：細(xì)胞本身就非常珍貴不能丟
有時(shí)候會(huì)遇到一些特別珍貴的細(xì)胞或是病毒樣品，即便是污染了也希望可以拯救一下，減少損失。
針對(duì)細(xì)胞不同的特性，處理方式也有些許區(qū)別：
一、短時(shí)間內(nèi)就要收樣的病毒或細(xì)胞樣品：
可以用德國(guó)MB公司的Mynox® 對(duì)樣本進(jìn)行快速清除。
它來(lái)自枯草芽孢桿菌提取物，可以特異性地與支原體膜結(jié)合，改變其通透性，能夠在2-3小時(shí)內(nèi)快速清除支原體，使用方法如下：
二、需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、保存的樣本：
可以用Mynox® Gold對(duì)樣本進(jìn)行*清除。
它是上面Mynox®的升級(jí)版，配合自帶的「鞏固防護(hù)液」，可以在后續(xù)的培養(yǎng)中（約1個(gè)月）持續(xù)發(fā)揮殺滅支原體的作用，并預(yù)防支原體生長(zhǎng)，適合需要反復(fù)傳代、長(zhǎng)期保存的珍貴細(xì)胞，方法如下：
以上兩種方法搭配支原體環(huán)境祛除產(chǎn)品一起使用，消滅支原體更*，防止復(fù)發(fā)！
處理方法：Mynox®或Mynox® Gold
并清潔空間和器械
處理難度：
Vol.4
情景四：環(huán)境中的支原體祛除
講真，實(shí)驗(yàn)用的支原體祛除試劑屬實(shí)不便宜，為了不給支原體卷土重來(lái)的機(jī)會(huì)，最好同時(shí)把實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的支原體也一起消滅（試驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、液氮罐、移液器），常見(jiàn)的有以下這些方法：
順便用Water Shield™把培養(yǎng)箱和水浴鍋的水槽也一并清潔了，保持水源的潔凈。
處理方法：使用專門(mén)的環(huán)境用支原體祛除試劑
處理難度：
雖說(shuō)現(xiàn)在市面上各種各樣的支原體清除產(chǎn)品層出不窮，但避免污染的最好方式還是注意實(shí)驗(yàn)規(guī)范以及定期清潔，最后希望大家的實(shí)驗(yàn)都順順利利，原理污染。
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